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口腔科学论文_负载TGF-β_3及BMSCs的Pluronic
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摘要：文章摘要:目的 制备负载TGF-β 3 及BMSCs的Pluronic F-127复合凝胶，观察其体内、外成骨及成血管作用。方法 取新西兰大白兔胫骨及股骨骨髓，分离培养BMSCs并传代，取第3代细胞经成骨、成脂
文章摘要:目的 制备负载TGF-β3及BMSCs的Pluronic F-127复合凝胶，观察其体内、外成骨及成血管作用。方法 取新西兰大白兔胫骨及股骨骨髓，分离培养BMSCs并传代，取第3代细胞经成骨、成脂诱导培养鉴定后用于后续实验。采用L-DMEM培养基溶解Pluronic F-127粉末、TGF-β3，分别制备Pluronic F-127凝胶、TGF-β3+Pluronic F-127凝胶、BMSCs+Pluronic F-127凝胶、TGF-β3+BMSCs+Pluronic F-127凝胶。取第3代BMSCs，分别采用L-DMEM培养基（A组）、成骨诱导液（B组）、含Pluronic F-127凝胶的成骨诱导液（C组）、含TGF-β3+Pluronic F-127凝胶的成骨诱导液（D组）培养14 d后，ALP染色和茜素红染色观测成骨情况；另采用含Pluronic F-127凝胶的L-DMEM培养基（实验组）、L-DMEM培养基（对照组）培养1、2、3、4 d,MTT法检测细胞增殖情况。取10只新西兰兔制备上颌窦提升模型后，于每只兔骨缺损处注入Pluronic F-127凝胶（A组）、TGF-β3+Pluronic F-127凝胶（B组）、BMSCs+Pluronic F-127凝胶（C组）、TGF-β3+BMSCs+Pluronic F-127凝胶（D组），于第8周取材行影像学检查、HE染色观察新骨形成情况，免疫组织化学染色观察骨组织VEGF及BMP-2表达情况，Western blot检测骨组织VEGF、抑瘤素M（oncostatin M,OSM）及BMP-4蛋白表达。结果 成骨、成脂诱导鉴定示分离培养细胞为BMSCs。体外实验染色显示D组ALP活性及茜素红浓度高于其他组（P<0.05）;MTT法检测示随着时间延长，两组吸光度（A）值均逐渐升高，各时间点组间比较差异均无统计学意义（P>0.05）。体内实验影像学检查示D组成骨密度及成骨连续性最好，新骨体积占比优于其他组（P<0.05）;HE染色示与其他组比较，D组骨小梁致密且排列规则，其上分布大量成骨细胞和破骨细胞，可见大量新骨形成；免疫组织化学染色示D组BMP-2、VEGF呈强阳性表达（P<0.05）;Western blot检测D组VEGF、OSM及BMP-4蛋白相对表达量高于其他组（P<0.05）。结论 负载TGF-β3及BMSCs的Pluronic F-127复合凝胶中的BMSCs能被诱导分化为成骨细胞，并且复合凝胶对细胞无毒性，在兔上颌窦内有明显成骨及成血管效果。
文章关键词:
论文分类号:R783.1
文章来源：《中国组织工程研究》 网址: http://www.zgzzgcyj.cn/qikandaodu/2021/1025/1875.html