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中药学论文_槲皮素对牙髓间充质细胞成骨能力及

来源:中国组织工程研究 【在线投稿】 栏目:期刊导读 时间:2021-10-22
作者:网站采编
关键词:
摘要:文章目录 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 主要试剂与仪器 1.1.2 实验动物 1.2 方法 1.2.1 hDPSCs分离培养与传代 1.2.2 流式细胞术鉴定hDPSCs表面标志物 1.2.3 细胞增殖检测 1.2.4 碱性磷酸酶(ALP)定量检

文章目录

1 材料与方法

1.1 材料

    1.1.1 主要试剂与仪器

    1.1.2 实验动物

1.2 方法

    1.2.1 hDPSCs分离培养与传代

    1.2.2 流式细胞术鉴定hDPSCs表面标志物

    1.2.3 细胞增殖检测

    1.2.4 碱性磷酸酶(ALP)定量检测

    1.2.5 碱性磷酸酶及茜素红S染色

    1.2.6 实时荧光定量PCR(qPCR)

    1.2.7 hDPSCs在支架材料上的接种与检测

    1.2.8 动物模型制备与检测

    1.2.9 统计学分析

2 结果

2.1 hDPSCs的流式鉴定

2.2 槲皮素对细胞增殖的影响

2.3 成骨诱导后ALP定量检测

2.4 碱性磷酸酶及茜素红S染色

2.5 成骨基因的表达

2.6 支架材料复合物的检测

2.7 Micro-CT结果

3 讨论

文章摘要:目的 研究槲皮素对人牙髓间充质细胞(human dental pulp mesenchymal stromal cells,hDPSCs)体外及体内成骨能力的影响。方法 通过对牙髓组织培养获得hDPSCs,流式鉴定特征性表面抗原;CCK-8检测细胞毒性;碱性磷酸酶(ALP)和茜素红染色检测细胞体外成骨能力;qPCR检测成骨基因的表达;在10只雄性新西兰兔颅骨上造4个8 mm直径的圆形骨缺损,随机分为4组:A组含1μmol·L-1槲皮素的完全培养液培养的hDPSCs接种于Bio-Oss?骨粉组,B组常规完全培养液培养的hDPSCs接种于Bio-Oss?骨粉组,C组Bio-Oss?组,D组空白组。术后4、8周取标本行Micro-CT三维重建,计算骨体积分数评估成骨效果。结果 低浓度的槲皮素无细胞毒性且1μmol·L-1可促进细胞增殖;0.1、1μmol·L-1槲皮素可提高ALP的活性水平;ALP和茜素红染色结果进一步证实槲皮素后能够促进ALP和钙结节的形成;Micro-CT显示在术后4、8周A组新骨形成较B、C组多,D组成骨效果不明显。结论 槲皮素可促进hDPSCs的增殖与体外及体内的成骨分化。

文章关键词:

项目基金:《中国组织工程研究》 网址: http://www.zgzzgcyj.cn/qikandaodu/2021/1022/1874.html



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