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中药学论文_当归多糖拮抗D-半乳糖致大鼠脑衰老
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摘要:文章目录 1 材料与方法 1.1 实验动物 1.2 主要试剂 1.3 大鼠衰老模型构建与分组给药 1.4 衰老大鼠空间学习记忆能力检测(水迷宫实验) 1.5 脑组织衰老检测(Sa-β-Gal染色) 1.6 海马匀浆中IL-1β、
文章目录
1 材料与方法
1.1 实验动物
1.2 主要试剂
1.3 大鼠衰老模型构建与分组给药
1.4 衰老大鼠空间学习记忆能力检测(水迷宫实验)
1.5 脑组织衰老检测(Sa-β-Gal染色)
1.6 海马匀浆中IL-1β、IL-6含量与SOD、MDA和GSH活性检测
1.7 检测海马细胞端粒长度(Southern blot法)与海马端粒酶活性(TRAP-PCR银染法)
1.8 神经干细胞分离纯化与分组
1.9 流式细胞仪检测NSCs的ROS水平
1.1 0 酶标比色法检测NSCs的MDA含量
1.11 qRT-PCR检测NSCs的p19、p21、p53 mRNA表达
1.12统计学分析
2 结果
2.1 小鼠衰老生物学动态情况
2.2 ASP对脑衰老大鼠空间学习记忆能力的影响
2.3 ASP对脑衰老模型大鼠海马神经细胞衰老的影响
2.4 ASP对脑衰老大鼠海马抗氧化能力的影响
2.5 ASP对脑衰老大鼠海马IL-1β,IL-6含量的影响
2.6 ASP对脑衰老大鼠海马区端粒长度及端粒酶活性的影响
2.7 NSCs的Nestin表达鉴定
2.8 ASP对衰老NSCs的ROS水平和MDA含量的影响
2.9 ASP对衰老NSCs的p19、p21、p53 mRNA表达的影响
3 讨论
文章摘要:目的探讨当归多糖(Angelica sinensis polysaccharide,ASP)拮抗氧化致衰剂D-半乳糖(D-galactose,D-gal)致大鼠脑衰老的作用。方法将SD大鼠分为对照组、ASP组、衰老模型组、ASP衰老模型组。采用水迷宫检测各组大鼠空间学习记忆能力;衰老相关β半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测脑组织细胞衰老;色谱法测量海马匀浆SOD、MDA和GSH的含量; ELISA法检测海马组织匀浆中IL-1β,IL-6的含量; Southern blot检测海马细胞端粒长度,TRAP-PCR检测端粒酶活性。从SD胎鼠脑组织中分离、培养、鉴定神经干细胞(neural stem cells,NSCs)。将培养第3代NSCs分为对照组、ASP组、衰老模型组、ASP衰老模型组。色谱法测定细胞内MDA含量;流式细胞仪测定细胞内ROS水平; RT-PCR检测衰老相关基因的p19、p21、p53 mRNA的表达。结果与衰老模型组相比,ASP衰老模型组大鼠空间学习记忆能力明显改善;脑组织中SA-β-Gal染色阳性的细胞数减少(P<0.05);海马区SOD、GSH含量增高,MDA含量降低(P<0.05); IL-1β,IL-6的分泌水平降低(P<0.05);端粒长度和端粒酶活性增加。成功分离并鉴定出NSCs;与NSCs衰老组相比,ASP衰老组NSCs中MDA含量和ROS水平显著降低(P<0.05);衰老相关基因p19、p21、p53 mRNA表达降低(P <0.05)。结论 ASP可能通过调控细胞端粒长度和端粒酶活性,下调衰老相关基因表达,降低炎症因子表达,提高细胞抗氧化能力,进而拮抗D-gal对NSCs和海马细胞的致衰作用。
文章关键词:
论文DOI:10.16016/j.1000-5404.202103187
论文分类号:R285.5
文章来源:《中国组织工程研究》 网址: http://www.zgzzgcyj.cn/qikandaodu/2021/1013/1860.html