生物医学工程论文_丝素蛋白构建骨组织工程多孔 -中国组织工程研究杂志社投稿

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生物医学工程论文_丝素蛋白构建骨组织工程多孔

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关键词:

摘要：

文章目录

0引言Introduction

1 材料和方法Materials and methods

1.1 设计

1.2 时间及地点

1.3 材料

1.3.1 实验动物

1.3.2 实验主要试剂及仪器

1.4 实验方法

1.4.1 丝素蛋白溶液的制备

1.4.2丝素蛋白多孔支架的制备

1.4.3 支架性能指标测定

1.4.4 大鼠骨髓间充质干细胞的培养与鉴定

1.4.5制备复合支架

1.4.6 复合支架特性光谱的测定

1.4.7 CCK-8检测细胞增殖

1.4.8 最佳条件制备复合支架的表征

1.4.9 最佳条件制备的复合支架与细胞共培养

1.5 主要观察指标

1.6 统计学分析

2 结果Results

2.1 骨髓间充质干细胞培养与“干”性检测结果

2.2 丝素蛋白支架的表征结果

2.2.1 支架的性能

2.2.2 支架的微观结构

2.3 复合支架的表征结果

2.3.1 支架对细胞增殖的影响

2.3.2 支架的压缩强度和拉伸强度

2.3.3支架的傅里叶红外光谱图

2.3.4 支架复合细胞后的组织学观察

2.3.5 支架复合细胞后的扫描电镜观察

2.3.6 支架复合细胞后的RT-PCR检测

2.4 支架的生物相容性

3 讨论Discussion

3.1 丝素蛋白及其复合物孔径的研究

3.2 丝素蛋白支架压缩强度与浓度及聚乙二醇的关系

3.3聚乙二醇-丝素蛋白支架的生物相容性和细胞调控性

3.4 结论

文章摘要:背景:丝素蛋白支架的致孔技术多采用冷冻或者冷冻干燥法制取,但不同浓度、温度等条件对支架的物理生物性能有影响,对骨组织支架的制取采用何种冷冻方式、哪种浓度尚无明确的专题研究。目的:研究水致孔条件下丝素蛋白溶液质量浓度、冷冻条件、10 g/L聚乙二醇对丝素蛋白支架属性的影响,选择适合骨组织工程支架的制作条件。方法:制备30,60,90 g/L的丝素蛋白溶液,-20℃预冷冻后每种质量浓度的丝素蛋白溶液分4组处理,制备多孔支架:-20℃冷冻处理组、-60℃冷冻处理组、-20℃冻干处理组、-60℃冻干处理组。测定各组支架的孔径、亲水性、致孔率、压缩强度与细胞相容性,扫描电镜下观察支架的微观结构,通过以上结果获得制备多孔支架的最佳冷冻条件与丝素蛋白溶液质量浓度。将聚乙二醇与60 g/L的丝素蛋白溶液混合均匀,-60℃冻干处理制备丝素蛋白多孔支架,检测复合支架的压缩强度、拉伸强度与细胞相容性。结果与结论:（1）由孔径、亲水性、致孔率、压缩强度与细胞相容性实验结果可知,60 g/L丝素蛋白溶液经-20℃预冷冻后再经-60℃冻干处理可获得最佳的多孔支架,该支架的孔径为（213.07±37.89）μm、孔致率为85%,可促进骨髓间充质干细胞的增殖。（2）加入聚乙二醇可提升丝素蛋白支架的压缩强度与拉伸强度（P <0.05）。（3）将骨髓间充质干细胞接种于聚乙二醇-丝素蛋白复合支架上,共培养7 d的扫描电镜显示细胞与支架贴壁充分,细胞表面突触充分舒展;共培养2周时的苏木精-伊红染色显示,细胞贴附于支架壁上,核深染,4周时细胞在支架孔的通道内贴合紧密,充满整个通道,增殖较快;共培养2周的免疫组化染色显示,Ⅰ型胶原、RUNX2、骨钙素呈阴性表达;共培养3周的RT-PCR检测显示,复合支架对骨髓间充质干细胞的分化无影响。（4）结果表明,-60℃条件下60g/L的丝素蛋白溶液经冷冻干燥制作的多孔支架较适合骨组织工程使用,10 g/L的聚乙二醇可提升支架的拉伸和压缩强度,该支架对细胞分化无诱导作用。

文章关键词:

论文分类号:R318.08

文章来源：《中国组织工程研究》网址: http://www.zgzzgcyj.cn/qikandaodu/2021/0929/1853.html